Efecto de una inyección de morfina sistémica sobre algunos aminoácidos en la corteza cingulada anterior en el dolor agudo / Effect of a simple morphine system injection in some aminoacids in the anterior cingulate cortex during acute pain

El objetivo del presente trabajo fue investigar los efectos de una inyección única de morfina intraperitoneal, sobre el nivel extracelular de arginina, glutamato, aspartato y GABA en la corteza cingulada anterior en ratas durante la fase I del test de la formalina. Se usó una combinación de microdiálisis y de Electrophoresis Capilar de Zona con Detección de Fluorescencia Inducida por Láser (CZE-LIFD), para medir los niveles extracelulares de aminoácidos en los microdializados. Las cánulas de microdiálisis fueron implantadas unilateralmente en la corteza cingulada anterior izquierda en ratas que se mueven libremente. Las muestras tomadas cada 30 seg, se derivatizaron con el colorante isotiocianato de fluoresceína y se midió con CZE-LIFD: arginina, glutamato, aspartato y GABA. Durante los primeros minutos del test de la formalina (fase I), se produjo un aumento significativo de arginina (p < 0,001) y glutamato (p < 0,012). En las ratas pretratadas con morfina el aumento de glutamato después de la formalina fue suprimido, y se observó un aumento transitorio del GABA (p < 0,001). Estos experimentos sugieren que hay cambios rápidos de neurotransmisores en los primeros minutos en el dolor agudo, como son el aumento de glutamato encontrado en la corteza cingulada anterior, quizás relacionados con la aversión y el temor. La inyección previa de morfina produce aumento del GABA y elimina el aumento de glutamato inducido por la formalina en los primeros minutos, lo que pudiera estar relacionado con los efectos analgésicos, recompensantes y/o euforizantes de la morfina.

Cambios en aminoácidos luego de administración intraperitoneal de veneno del escorpión Tityus zulianus en ratones: Estudio con microdiálisis subcutánea y electroforesis capilar

Resumen. El envenenamiento por escorpiones es un problema de salud pública en la zona suroccidental de Venezuela. El Tityus zulianus es uno de los escorpiones que causa, especialmente en niños, edema pulmonar e insuficiencia cardíaca que pueden ser fatales y que se han atribuido en parte a una gran descarga simpática. La administración intraperitoneal de (20 µg/g peso) de veneno del T. zulianus a ratones anestesiados durante microdiálisis subcutánea provocó aumento de secreciones, dificultad respiratoria, convulsiones y muerte entre 30 min a 2 h. En los dializados recolectados antes y después de recibir el veneno, se analizaron 7 aminoácidos por electroforesis capilar con detección mediante fluorescencia inducida por láser (EC-DFIL). Se encontró un aumento en arginina (39%), fenilalanina (40%) y glutamato (94%), sin cambios en valina, serina y aspartato, en los animales que recibieron veneno con respecto a sus valores pretratamiento. Estos cambios porcentuales fueron significativos al comparar veneno vs. vehículo después de la inyección; y antes vs. después de recibir el veneno. Para este momento no hay una explicación clara del significado de estos aumentos de aminoácidos específicos. Se requieren nuevos estudios para conocer si estos cambios bioquímicos tienen o no una relación con los mecanismos de acción molecular del veneno o algunos de sus componentes y/o con las manifestaciones clínicas. De acuerdo con la literatura revisada, este es el primer reporte de la combinación de microdiálisis subcutánea y EC-DFIL en el estudio in vivo del emponzoñamiento por escorpiones en ratones.

Abstract. Scorpion human envenoming is a public health hazard in the southwest of Venezuela. Tityus zulianus is one of the scorpion species whose venom causes lung edema and cardiac failure in children. These occasionally deadly manifestations have been attributed to a massive sympathetic discharge. The intraperitoneal administration of T. zulianus venom (20 µg/g mouse) to anesthetized mice during subcutaneous microdialysis caused increased secretions, dyspnea, seizures and death between 30 min to 2 h. Seven amino acids were analyzed by capillary electrophoresis with laser induced fluorescence detection (CE-LIFD) in the collected samples before and after the venom administration. We found an increase of arginine (39%), phenylalanine (40%) and glutamate (94%), with no changes in valine, serine and aspartate, changes were significant when the injection of venom and vehicle were compared and before vs after venom injection. Further investigation is needed to know if the observed changes could be related to the molecular mechanisms of the venom or some of its components and therefore with the envenoming symptoms. To our knowledge, this is the first report with subcutaneous microdialysis and CE-LIFD coupling in scorpion envenomation studies in vivo, in mice.

Microdiálisis subcutánea: una técnica simple para monitorizar el ambiente bioquímico extracelular: combinación con electroforesis capilar y detección mediante fluorescencia inducida por láser / Subcutaneous microdialysis: simple technique to monitor biochemical extracellular environment: coupling with capillary electrophoresis and laser-induced fluorescence detection

La microdialisis es una técnica que permite seguir los cambios de sustancias endógenas o exógenas presentes en cualquier comportamiento extracelular. Actualmente tiene muchas aplicaciones tanto experimentales como clínicas. El muestreo en el fluido extracelular subcutáneo es especialmente util para evaluación del metabolismo en pacientes en condiciones críticas, estudios farmacocinéticos y monitoreo de glucosa. Presentamos algunos ejemplos de estas aplicaciones, usando una cánula fabricada manualmente con un segmento de tubo de celulosa (200 µm de diámetro externo y poros de 13.000 daltons de peso molecular) ensamblado entre tubos de acero inoxidable (26 ga. de diámetro externo) para ser insertada en el tejido subcutáneo, en pacientes en condiciones críticas o en anestesiados, para analizar patrones de aminoácidos por electroforesis capilar con detección mediante fluorescencia inducida por láser (EC-DFIL). También fue usada ambulatoriamente para medir glucosa en voluntarios. Los resultados muestran que la microdiálisis subcutánea es un método muy simple, no costoso ni agresivo, con ventajas sobre la obtención de muestras de sangre por punción repetida e inclusive sobre microdialisis endovenosa. Este método, combinado con una técnica analítica apropiada, puede usarse exitosamente en la vigilancia del ambiente químico extracelular en condiciones clínicas o preclínicas muy diferentes.